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　　蛭弧菌是一種具有類似噬菌性質(zhì)的細(xì)菌，但它不是噬菌體，更不是細(xì)菌。它對(duì)弧菌有較強(qiáng)的裂解作用，是水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要病菌“弧菌”的天敵。

　　近兩年，蛭弧菌產(chǎn)品的使用突然火了起來(lái)，市面上也出現(xiàn)了各式各樣的蛭弧菌產(chǎn)品，有液體蛭弧菌，有粉劑蛭弧菌，還有蛭弧菌凍干粉，尤其是蛭弧菌凍干粉成了推廣的新潮流，同樣都是蛭弧菌凍干粉，有的產(chǎn)品用的很好，有的產(chǎn)品用了卻見不到效果，很多養(yǎng)殖戶甚至廠家都對(duì)蛭弧菌相關(guān)產(chǎn)品抱有疑問(wèn)，本文通過(guò)對(duì)蛭弧菌知識(shí)的初步梳理，為養(yǎng)殖戶、經(jīng)銷商、公司更好地理解、使用蛭弧菌產(chǎn)品提供一些思路。

　　蛭弧菌也叫噬菌蛭弧菌，屬于細(xì)菌界變形細(xì)菌門蛭弧菌科蛭弧菌屬，具有細(xì)菌的一切形態(tài)特征：

　　單細(xì)胞，弧形或逗點(diǎn)狀，有時(shí)呈螺旋狀。0.3-0.6×0.8-1.2微米，或僅為桿菌長(zhǎng)度的1/3-1/4，端生鞭毛，比其他細(xì)菌的鞭毛粗3倍~4倍，與鞭毛相對(duì)的一端有釘狀纖毛，被稱為“感染錐子”，與菌體的識(shí)別和吸附宿主有關(guān)。其運(yùn)動(dòng)活躍，革蘭氏染色陰性。

　　蛭弧菌比通常的細(xì)菌要小，能通過(guò)細(xì)菌濾器，所以普通的顯微鏡是看不到它的，至少要用到油鏡，甚至需要染色才行。在相差顯微鏡下，可見蛭弧菌呈跳躍式的運(yùn)動(dòng)；電鏡觀察，蛭弧菌以弧、桿狀為主。因?yàn)樾。陀?萬(wàn)轉(zhuǎn)的離心機(jī)對(duì)蛭弧菌的濃縮是沒有意義的，而2萬(wàn)轉(zhuǎn)的離心機(jī)一般是實(shí)驗(yàn)室才會(huì)配備。

　　蛭弧菌有寄生型，也有兼性寄生，極少數(shù)營(yíng)腐生。非寄生型營(yíng)腐生生活，可在蛋白胨和酵母提取物培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖。從自然界分離得到的蛭弧菌都是依賴寄生型，迄今為止，還沒有直接從自然界分離得到非寄生型。

　　寄生型蛭弧菌生長(zhǎng)，一般要求pH6.0-8.5；溫度23℃~37℃，低于12℃，高于42℃時(shí)均不生長(zhǎng)；能穩(wěn)定分解蛋白質(zhì)，一般不利用碳水化合物，而以肽、氨基酸作碳源和能源；能液化明膠；嚴(yán)格好氧。

　　溫度不在適宜范圍的時(shí)候，蛭弧菌是不生長(zhǎng)的，所以使用時(shí)要充分考慮這一點(diǎn)。比如3月、4月份用它泡苗，效果肯定不好，如果改成拌料投喂，會(huì)對(duì)腸道控菌產(chǎn)生積極影響。

　　蛭弧菌的繁殖需要氧氣，使用的時(shí)候也建議在早上8點(diǎn)~10點(diǎn)使用，這樣可以獲得較為充足的溶氧。另外，其耗氧不會(huì)達(dá)到非常劇烈的程度，因?yàn)槠浞敝炒鷷r(shí)一般要4小時(shí)~6小時(shí)。

　　蛭弧菌與宿主細(xì)胞之間，常表現(xiàn)出一定的特異性。不過(guò)，有的特異性較差，能侵入多種細(xì)菌。例如不同的蛭弧菌菌株，能侵入各類不同的植物病原菌。

　　從這一點(diǎn)上看，其比噬菌體（病毒）、細(xì)菌素（蛋白質(zhì)）的廣譜性要好。實(shí)際上蛭弧菌可感染許多不同科屬的菌，但其總體上有一定偏向性，比如其可感染大多數(shù)革蘭氏陰性細(xì)菌（如志賀氏菌屬、沙門氏菌屬、埃希氏菌屬、歐文氏菌屬、變形桿菌屬、弧菌屬、假單胞菌屬、鉤端螺旋體等微生物），但只對(duì)少數(shù)的革蘭氏陽(yáng)性（如糞鏈球菌、乳酸菌等）細(xì)菌感興趣，比如其不裂解枯草桿菌，同時(shí)也有報(bào)道指出其對(duì)某些真菌和腸道病毒也有一定的裂解活性。

　　寄生的特異性也對(duì)實(shí)際使用方法有很大的影響，即蛭弧菌是不是不管好菌壞菌都會(huì)攻擊？如果是這樣的話，那么很難被我們所用了，實(shí)際上，其有一定傾向性，這就給實(shí)際的應(yīng)用提供了更多的可能性。

　　華南理工大學(xué)郭衍彪郭衍彪（2016年）的研究指出，蛭弧菌BDW03對(duì)試驗(yàn)組大菱鲆腸道沒有控制作用的菌屬為8個(gè)（占53.3%），這8個(gè)菌屬中多為革蘭氏陽(yáng)性菌屬（6/8）。另外，其通過(guò)乳酸菌拌食餌料和潑灑BALOs喂食大菱鲆60小時(shí)后，乳酸菌和BALOs對(duì)大菱鲆腸道菌群中革蘭氏陰性菌的控制作用（分別占總菌屬的33.3%和26.7%）優(yōu)于對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的控制作用（分別占總菌屬的26.7%和20.0%）。這也間接指出了蛭弧菌對(duì)細(xì)菌的裂解可能有一定的偏向性。

　　上海水產(chǎn)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院徐琴等人（2009）的研究指出，加噬菌蛭弧菌和黏紅酵母組的試驗(yàn)效果不理想，表明這兩株菌體之間有一定的拮抗作用。而聯(lián)合使用噬菌蛭弧菌和球形紅假單胞菌（是紫色非硫光合細(xì)菌紅假單胞菌屬的一個(gè)種）組展示了凈化水質(zhì)，預(yù)防病害的優(yōu)良前景，此組能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物質(zhì)。這也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合細(xì)菌直接混合使用的，這一點(diǎn)大大提高了使用的方便性。

　　再加上其他專家的一些總結(jié)，基本上蛭弧菌更偏向于革蘭氏陰性桿菌，同時(shí)從即有的論文得知，其*不要用酵母混用，但蛭弧菌可以和光合細(xì)菌混用，建議*分開使用。同時(shí)還有一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，即在一個(gè)20天的周期內(nèi)，蛭弧菌對(duì)水體的調(diào)控作用能達(dá)到近2周時(shí)間。

　　蛭弧菌要用雙層平板而不用單層平板法檢測(cè)，主要原因在于培養(yǎng)皿底部并不是十分平整，因此注入少量培養(yǎng)基鋪平底部作為下層，會(huì)獲得幾近水平的底部，然后在上面將噬菌體和細(xì)菌混合物的培養(yǎng)基（比較薄）注入作為上層，這樣使得觀察物在同一平面，更利于噬菌斑的觀察及分離純化。

　　揚(yáng)州大學(xué)王亞麗（2007年）的研究指出，將蛭弧菌分離株BD5W以107pfu/mL濃度給小鼠灌胃，試驗(yàn)組和對(duì)照組均健康，證明噬菌蛭弧菌對(duì)小鼠沒有毒性作用。

　　江蘇省泰州市海陵區(qū)畜牧獸醫(yī)站徐懿（2011年）在噬菌蛭弧菌BD57的急性毒性試驗(yàn)研究指出，根據(jù)《獸藥試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范匯編》的要求選用小白鼠進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)。分別采用灌胃和腹腔注射法進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明，噬菌蛭弧菌BD57對(duì)小鼠沒有毒性作用。

　　華南理工大學(xué)陳麗蕓（2012年）的研究也指出，至今沒有發(fā)現(xiàn)蛭弧菌對(duì)真核細(xì)胞有毒的報(bào)道，對(duì)小白鼠、豚鼠、家兔等動(dòng)物無(wú)毒性作用，對(duì)猴腎、Hela細(xì)胞組織培養(yǎng)也未引起細(xì)胞病變。迄今為止，相關(guān)報(bào)道表明蛭弧菌對(duì)人和某些動(dòng)物無(wú)毒害作用。

　　蛭弧菌對(duì)于宿主菌的裂解過(guò)程一般分為五個(gè)步驟：識(shí)別、吸附與侵入、定位與合成、復(fù)制、裂解。

　　識(shí)別：在這個(gè)過(guò)程中，有趣的是蛭弧菌可以通過(guò)鞭毛實(shí)現(xiàn)跳躍式的運(yùn)動(dòng)，而向宿主菌快速移動(dòng)，其是通過(guò)無(wú)鞭毛一端粘附于宿主菌表面的。鞭毛在這里起到了非常重要的作用，實(shí)際上，在一些發(fā)酵的試驗(yàn)研究過(guò)程中也發(fā)現(xiàn)，如果發(fā)酵罐內(nèi)的漿葉轉(zhuǎn)速過(guò)快，對(duì)鞭毛有損傷的話，蛭弧菌就無(wú)法再攻擊宿主。

　　吸附與侵入：為了實(shí)現(xiàn)吸附與侵入這個(gè)目的，蛭弧菌菌體會(huì)以100轉(zhuǎn)/秒以上的速度產(chǎn)生一種機(jī)械“鉆孔”效應(yīng)，加上蛭弧菌入侵時(shí)的收縮從而進(jìn)入宿主菌的周質(zhì)空間。

　　定位與合成：一是蛭弧菌會(huì)脫掉鞭毛，二是宿主菌會(huì)變成蛭質(zhì)體。

　　復(fù)制：蛭弧菌在這個(gè)階段實(shí)現(xiàn)了復(fù)制繁殖。裂解：在*后一個(gè)過(guò)程中，蛭弧菌會(huì)合成鞭毛，裂解宿主的細(xì)胞膜，釋放出所有蛭弧菌。

　　蛭弧菌有五種保存方法，其中以冷凍干燥法保藏效果*，1個(gè)月的復(fù)活率為*，其次為4℃營(yíng)養(yǎng)肉湯液保藏法和-20℃甘油保藏法，17個(gè)月復(fù)活率均為67%。有一點(diǎn)要明確，其冷凍干燥完成之后，是在4℃環(huán)境中進(jìn)行保存的。

　　蛭弧菌的使用方法，特別推薦在所有甲殼類養(yǎng)殖動(dòng)物（小龍蝦、螃蟹、白蝦等）脫殼期之前使用，達(dá)到無(wú)刺激生物消毒這個(gè)效果。

　　脫殼期是這些養(yǎng)殖動(dòng)物特別脆弱的時(shí)期，容易感染相關(guān)疾病，尤其是溫度升高的時(shí)候更是如此；另外，在脫殼期，甲殼類動(dòng)物特別敏感，很多消毒劑是不能使用的，而蛭弧菌則可以做到安全無(wú)刺激；使用上，建議提前2天左右使用，如果能先使用一些補(bǔ)鈣產(chǎn)品之后再使用蛭弧菌那就更好了，因?yàn)橐欢康拟}離子可以促進(jìn)蛭弧菌的繁殖。

　　推廣“配合化學(xué)消毒劑治療疑難雜癥”。到了養(yǎng)殖中后期，在溫度高的時(shí)候，有些疾病非常難以治療，主要的特點(diǎn)是止不住、易反復(fù)，這個(gè)原因主要在于化學(xué)消毒劑雖然具備了快速殺菌的效果，但其反彈也非常迅速，一般普通的化學(xué)消毒劑或者國(guó)標(biāo)抗生素，使用后24小時(shí)~48小時(shí)，水體的總菌數(shù)甚至弧菌數(shù)可能比用前還要高，這可能是難以治療的主要原因。

　　為了讓殺菌即迅速又持久，必需結(jié)合使用化學(xué)消毒劑和蛭弧菌。首先使用化學(xué)消毒劑對(duì)水底、水面進(jìn)行綜合消毒，同時(shí)內(nèi)服國(guó)標(biāo)抗生素進(jìn)行體內(nèi)消毒，在見到效果之后，再連續(xù)使用1次~2次蛭弧菌，就可以看到明顯不同的治療效果。因?yàn)榛瘜W(xué)消毒劑起到了快速壓制的效果，而蛭弧菌則起到了長(zhǎng)期壓制有害菌的效果，強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合，能有效抑制有害菌的繁殖。

　　在使用過(guò)硫酸氫鉀底改片后，第二天可以大劑量使用有益菌，此時(shí)建議使用蛭弧菌和光合細(xì)菌一起混合使用，這一點(diǎn)已通過(guò)試驗(yàn)證明是可行的。也可以按20天一個(gè)周期，先行使用光合細(xì)菌，一周后再使用蛭弧菌原裝凍干粉，也能達(dá)到比較好的使用效果。

　　蛭弧菌主要針對(duì)大腸桿菌引起的相關(guān)腸炎疾病，因?yàn)樵诎l(fā)酵蛭弧菌之前，必需先行生產(chǎn)大腸桿菌，再將蛭弧菌接種進(jìn)去，大腸桿菌是蛭弧菌*為喜愛的細(xì)菌之一，因此其治療此類腸炎效果會(huì)更好一些。另外，蛭弧菌本身就是一個(gè)寶庫(kù)，其蛋白質(zhì)含量豐富，可達(dá)細(xì)胞干重的60%~65%，DNA的含量為5%。

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