一、 菌種制作的基本設備。
1、食用菌菌種制作的工藝流程:
培養料的貯備和預處理------- 容器、工具的洗滌------ 配料、培養基制作------ 滅菌------ 冷卻------ 接種------ 培養------- 貯存
2、基本設施:
① 廠房:② 原料庫③原料預處理場地④ 洗滌室:5配料室⑥ 滅菌室⑦ 接種室⑧ 化驗室 ⑨ 培養室⑩貯存室
二、純種分離。
菌種的分離方法主要有:孢子分離法、組織分離法、基內菌絲分離法和土中菌絲分離法。
1、孢子分離法:屬有性繁殖。對于香菇、平菇異宗結合的菇類,為避免產生單孢不孕現象,必須采用多孢分離法。單孢分離法主要用于雜交育種的研究。
(1) 種菇的選擇和處理 種菇選擇的標準:必須純正,具有本菌株性狀,發育健壯,無病蟲害,成熟度適當。種菇選定后,首先除去附著在菇體表面的雜物,如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分鐘,然后用無菌水漂洗3次,以洗除表面附著的藥物,*后用無菌紗布吸干水分。香菇、平菇可用75%酒精進行表面消毒。
(2)多孢分離法 ① 整菇播種法② 鉤懸法③ 貼附法 4菌褶上抹取孢子法⑤ 孢子印分離法 ⑥ 空中孢子捕捉法。
(3)單孢子分離法:一般采用方法:平板稀釋法、連續稀釋法、毛細管法等。
2、組織分離法:
(1)子實體分離法。
(2)菌核分離法。
(3)菌索分離法:對一些不易找到子實體及菌核的菌類。
3、基內菌絲分離法 對于子實體只有在特定的季節下出現,平時不易采到,或子實體小而薄或呈膠質狀態。
(1)菇木(或耳木)分離法 在食用菌繁殖旺盛期。
(2)代料基質分離法 分離前,選擇一批子實體發生早、產量高、菇體尚幼嫩且生活力強而無病蟲害的栽培袋,待子實體將近成熟時,去掉子實體,然后用75%酒精將培養袋進行消毒后,在培養料下1.5cm處挑取0.3cm的培養料小方塊組織,接入試管培養基的中央,置于恒溫下培養。
3、土中菌絲分離法: 用于采集生長在土中的菇類菌絲體 三、制種技術 采用孢子分離、組織分離和基內菌絲分離等方法分離培養而獲得的純菌絲,經過原種的擴大培養和母種、栽培種的制作,即可作為食用菌生產用的菌種。
1、菌種的類型:母種、原種、生產種。
2、培養基的種類 天然培養基、合成培養基、半合成培養基。
3、原種制作 從擔孢子或菇體組織直接分離培養獲得的原種或引進的原種。
4、母種及生產種制作 將原種菌絲體移植到由糞、草、木屑、棉籽殼或麥粒等原料配制成的培養基上,而制成的菌種稱母種。將母種再擴大繁殖制成的菌種,稱栽培種或生產種。
5、培養基滅菌:
(1)高壓蒸汽滅菌法 瓊脂培養基采用1.05kg/cm2 壓力,溫度121℃ ,滅菌45-60分鐘;母種和栽培種固體培養基采用1.2-1.5kg/cm2 壓力,溫度123-129℃ ,滅菌1-1.5 小時。
(2) 常壓蒸汽滅菌。